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培養基牛膽的作用(ngm培養基膽固醇作用)

更新:2023-04-21 13:23編輯:bebe歸類:兩性養生人氣:0

ngm培養基膽固醇作用

培養基配方(成分g/L):

蛋白胨 10.0;牛肉提取物 10.0;酵母提取物 5.0;葡萄糖 20.0

檸檬酸三銨 2.0;乙酸鈉 5.0;MgSO4 0.1;MnSO4 0.05;K2HPO4 2.0

吐溫80 1.0

配制方法:

1.稱取55g本產品,加入1000ml純水重懸。

2.調節pH。

3.121°C滅菌15min。

MRS培養基結果與分析

乳桿菌的生長表現為培養基變渾濁。由于營養要求的不同,某些乳桿菌在該培養基上生長較差或不能生長。

應用:

MRS肉湯培養基用于降膽固醇乳酸菌的篩選及其降解機理研究。

用途:

MRS肉湯培養基根據DeMan、Rogosa和Sharpe法用于各種材料中乳酸菌菌種的增菌、培養和分離。 乳酸菌MRS肉湯和MRS瓊脂培養基(MRS固體培養基)也能用于乳桿菌鑒定中的檢測實驗。

工作原理:

蛋白胨提供氮源。牛肉浸粉和酵母提取物作為維生素來源。葡萄糖是可發酵的碳水化合物。培養基的微酸性環境,有利于乳酸桿菌的生長。乙酸鈉和檸檬酸銨是選擇劑,同時也是能量物質。乙酸鈉對革蘭氏陰性細菌和霉菌有抑制作用,但對乳酸桿菌無影響。硫酸鎂和硫酸錳提供代謝必需的離子。司班80或吐溫80是非離子型表面活性劑,輔助乳桿菌對營養物質的利用。

培養基膽鹽的作用是什么

麥康凱瓊脂培養基(Mac conkey,MAC)簡稱:Mac培養基。主要成分:蛋白胨、脙胨、豬膽鹽(或牛、羊膽鹽) 氯化鈉、瓊脂、乳糖、1%結晶紫水溶液、0.5%中性紅水溶液.麥康凱平板的原理:利用膽鹽來抑制革蘭陽性細菌的生長,而對傷寒等沙門菌有促進生長的作用。利用乳糖發酵,中性紅的顏色可把分解乳糖和不分解乳糖的細菌區別開。ss培養基又稱沙門菌及志賀培養基,菌呈無色菌落,大腸埃希菌呈桃紅色菌落用于糞便、分泌物中腸道致病菌及腸球菌的分離培養。

gibcodmem培養基

MEM-EBSS培養基與DMEM培養基有什么區別MEM培養基是哺乳動物細胞的理想培養基,通常用于貼壁細胞的培養,通過對配方進行修正,可以用于其他類型細胞的培養,如無鈣MEM培養基可以用于懸浮細胞的培養,含有Hank’s鹽的MEM培養基可以用于二倍體細胞的培養.體外培養細胞所需的營養物質與體內相同,主要有糖、氨基酸和維生素三大類.目前市面上銷售的合成培養基如1640、199等所含的氨基酸已足夠,但在使用合成培養基時,仍需加入一些天然成份,如人或動物的血清、血漿和胎汁等.目前主要使用血清,以牛血清為主.血清的生物效應早已證明,它含有多種促細胞生長因子、促貼附因子及其它活性物質等.不僅能促進細胞增長且能幫助細胞貼壁.不同血清對細胞作用不同. DMEM培養基和1640培養基在用途上還有不小的區別,如DMEM培養基體外培養的巨噬細胞存活率和成層率高、吞噬能力強,與RPMI 1640相比,DMEM可作為一種簡單而實用的體外分離培養巨噬細胞的培養基.

ngm培養基配方

準備工作

1、 緩沖液1×TSS的配制:

事先配制1M的氯化鎂——20.3g氯化鎂(6分子水結晶)/定容于100ml去離子水后封裝,不用滅菌。

取 干凈的100ml 量筒和100ml 燒杯,用量筒量取100ml去離子水,加入至燒杯中,取 1 g 蛋白胨,0.5g酵母抽提物,0.5g氯化鈉,10 g PEG(MW= 3350), 5ml DMSO,5ml 的1 M氯化鎂,溶解后用鹽酸或者氫氧化鈉調整pH為6.5,混勻后用0.22um 濾器過濾除菌。儲存在4度,保質期約6個月。

2、已劃平板(或者用槍頭沾取并稀釋后涂布)并在培養箱中培養的菌種——Dh5α,用于接種并振蕩培養。.兩個錐形瓶,分別裝有30 ml和50mlLB,滅菌后置于4℃冰箱備用。

3、 若干已滅菌的瓊脂平板,一個未加抗生素,用于第二步的接種。其余做轉化用。

大鼠細胞 TSS方法制備感受態細菌(又稱一步法)二、 感受態制備程序:

1、 前一天晚上調單菌落至30 mlLB中培養(12-16h),按1:100 比例將培養的菌液(500ul)加入到新鮮的50 ml LB培養液中,于37 ℃振蕩培養至OD600約為0.4(培養時間2h40~50min)。冰浴30分鐘后4度1000g離心10min,棄上清,收獲細菌。加入原體積十分之 一(這里為5 ml)的1× TSS 液(冰預冷)懸浮細胞,然后分裝成100 ul/份,全部冰上操作,-80度保存。

大鼠細胞 TSS方法制備感受態細菌(又稱一步法)三、 轉化時取一管(100 ul)感受態細菌,(凍存細胞應 置于冰上緩慢融化后立即使用)加入3-5ul DNA(0.1~100ng),輕輕混勻后冰浴30min。加入0.9ml含20mmol/L葡萄糖的LB培養液,37度150r/min溫和振蕩培養 60min,涂布,室溫放置約20分鐘后放于37度恒溫培養箱培養(17-20h)

ngm培養基不加膽固醇

在牛的右側倒數第二至第三肋間,切個3~3.5厘米寬的刀口,將膽囊取出割開,植入異物作核。核有雞蛋大,可用塑料制成,外包的確良白布,并用酒精浸泡消毒。需將兩個或3個核串在1根線上,核間距離1~2厘米。核植入膽囊后,注入長有大腸桿菌的培養液,用滅菌生理鹽水沖洗傷口,縫合囊,并將串核的固定線結節拴在縫合線上,把膽囊送回腹腔原處,縫合腹膜、肌肉和皮肌。手術后10天拆線。1年后再用手術辦法取出核心,刮掉表面附著物,烘干后便是人工培育的牛黃。

每頭牛一般可埋核2~3次。手術后對牛的生長發育、使役、配種、懷胎、產犢等均無明顯影響。黃?;蛩5囊塾?、菜用牛等都能培育牛黃。

培養基中添加膽固醇

酚紅在培養基中被用來作為PH值的指示劑:中性時為紅色,酸性時為黃色,堿性時為紫色.研究表明,酚紅可以模擬固醇類激素的作用,(特別是雌激素).為避免固醇類反應,培養細胞,尤其是哺乳類細胞時,用不加酚紅的培養基.由于酚紅干擾檢測,一些研究人員在做流式細胞檢測時,不使用加有酚紅的培養基.

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